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三糖铁琼脂培养基的实验内容

三糖铁琼脂培养基的实验内容

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①斜面碱性/底层碱性:不发酵碳水化合物,系不发酵菌的特征。如铜绿假单胞菌。
②斜面碱性/底层酸性:葡萄糖发酵、乳糖(和TSI中的蔗糖)不发酵,是不发酵乳糖菌的特征,如志贺菌。
③斜面碱性/底层酸性(黑色):葡萄糖发酵、乳糖不发酵并产生硫化氢,是产生硫化氢不发酵乳糖菌的特征。如沙门菌、亚利桑那菌、枸橼酸杆菌和变形杆菌等。
④斜面酸性/底层酸性:葡萄糖和乳糖(和TSI中的蔗糖)发酵,是发酵乳糖的大肠菌群的特征,如大肠埃希菌、克雷伯菌属和肠杆菌属。
(4)应用:
鉴别肠道杆菌用。KIA或TSI对初分离出的、可疑为革兰阴性杆菌鉴定特别有用。其反应模式是许多杆菌鉴定表的组成部分,也可作为观察其他培养基反应的有价值的质控依据。
(1)原理:克氏双糖铁(KIA)或三糖铁琼脂(TSI)培养基制成高层和短的斜面,其中葡萄糖含量仅为乳糖或蔗糖的十分之一,若细菌只分解葡萄糖而不分解乳糖和蔗糖,分解葡萄糖产酸使pH降低,因此斜面和底层均先呈黄色,但因葡萄糖量较少,所生成的少量酸可因接触空气而氧化,并因细菌生长繁殖利用含氮物质生成碱性化合物,使斜面部分又变成红色;底层由于处于缺氧状态,细菌分解葡萄糖所生成的酸类一时不被氧化而仍保持黄色。细菌分解葡萄糖、乳糖或蔗糖产酸产气,使斜面与底层均呈黄色,且有气泡。细菌产生硫化氢时与培养基中的liu酸亚铁作用,形成黑色的硫化铁。 
(2)方法:用接种针挑取待检菌的菌落,先穿刺接种到KIA或TSI深层,距管底3~5mm为止,再从原路退回,在斜面上自下而上划线,置35℃孵 育18~24h,观察结果。
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